Practica No.2 en Laboratorio Virtual- Tinción de Gram

 

Microbiologia de los Alimentos

    Tinción de Gram

    

   

   Catedrático: 

    Dra. Dinora Marina León Gutierrez

    Integrantes: 

    Zaudi Salmai Chavez Carvajal

     Katherine Cardenas Beristain

     Oudry Yamileth Rosado Balderas

     Marion Alejandra Quiroz Maldonado

     Jorge de Jesús Quinto Reyes

     Erick Antonio Martinez Rodriguez

Objetivo:

• El objetivo de la tinción de Gram es conseguir una prueba con la que sea posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas.

Fundamento teórico:

• Los principios de la tinción de Gram están basados en la composición y estructura de la pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada microorganismo. Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve, se tiñen de una forma u otra. Usando procesos químicos (colorantes) para la identificación de estas.
• Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se denominan Gram negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas de peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram), al microscopio aparecen incoloras.
•  El cristal violeta se une a la pared bacteriana y se estabiliza con el lugol. La mezcla alcohol-acetona disuelve la membrana externa de las bacterias Gram negativas (más fina que la de las Gram positivas) extrayéndose el cristal violeta. Después se tiñen solo las Gram negativas con safranina.

Materiales a utilizar:

·         Mechero de bunsen

·         Etanol (70%).

·         Encendedor de cazuela (pedernal)

·         Pipeta.

·         Tubo de ensayo

·         Asa de inoculación

·         Placa Petri

·         Agua destilada

·         Colorantes de tinción Gram (cristal violeta, lugol, alcohol-acetona 1:1, safranina)

·         Alcohol 96º

·         Papel secante

·         Microscopio óptico

 Dirección del simulador:

• Laboratorio virtual: https://virtuallabs.nmsu.edu/stain.php

 

Metodología:

 

Resultados:

En los resultados de las tinciones que realizamos en nuestro laboratorio tenemos que:

• En la muestra de la izquierda solo hay presencia de bacterias Gram positivas, pues todas las bacterias observables obtuvieron un color morado/violeta. Estas bacterias son cocos y diplococos. No se observan bacterias de tipo Gram negativas.
• En la muestra de la derecha, observamos la presencia de ambos tipos de bacterias, por lo que esta muestra está contaminada. Se logran distinguir cocos y diplococos Gram positivos, así como bacilos de tipo gramnegativos. Los cocos y diplococos adquirieron un tono morado/violeta, mientras que los bacilos se tornaron de color rosado.

 

Observaciones:

• Los pasos para la preparación del frotis fueron seguidos correctamente, al igual que los pasos para realizar la tinción, por lo que pudimos garantizar una visibilidad de las bacterias bajo el microscopio al final del procedimiento. 
• Los resultados de las tinciones indican que existe una contaminación en las muestras del yogurt. Las burbujas que se eran visibles a través del envase evidenciaron la posible contaminación del producto y así fue.

 Conclusiones de acuerdo al objetivo:

• La tinción de Gram se configura como el método más adecuado y practico en todos los ámbitos, para la detección tanto de bacterias Gram Positiva  y bacterias Gram negativas. 
• Y en los resultados y observaciones, hubo una clara distinción entre estas, dando especificidad en el análisis de los alimentos, siendo realmente útil en la mejoría de la calidad de los productos en la industria alimentaria.

 

Referencias:

·         Tinción de Gram (2008-2021). Virtual labs. Instituto Nacional de Alimentos y Agricultura del USDA. Consultado [15/03/2022]. Obtenido en: https://virtuallabs.nmsu.edu/stain.php

·         Roberto C. González Meléndez, Briseida Elizalde Cuevas, Marian Estefanía Cortés Cruz, Manuel Orduña Sánchez (2020). Las tinciones básicas en el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico. UNAM, FES Zaragoza. Pág. 82 a 103. Consultado [15/03/2022]. Obtenido en: https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/libros/cbiologicas/libros/Tinciones.pdf