Práctica virtual 1. Técnica de Siembra en Estría en Placa

Universidad Veracruzana 

Facultad de Nutrición 

EE Microbiología de alimentos 

Docente: Dra. Dinora Marina León Gutiérrez 

Febrero-Julio 2022

Integrantes

Cárdenas Beristain Katerine 

Chávez Carvajal Zaudi Salmaí 

Martínez Rodríguez Erick Antonio

Quinto Reyes Jorge de Jesús 

Quiroz Maldonado Marion Alejandra

Rosado Balderas Oudry Yamileth

Introducción

En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones que se conocen como “mixtas” ya que son con otros tipos de microorganismos. Los cultivos de estas mezclas se llaman por ello cultivos mixtos. Sin embargo, el conocimiento de los microorganismos se consigue mediante el estudio de cepas aisladas, cultivadas en el laboratorio en cultivos puros.

La identificación bacteriana y la caracterización completa solo es posible tras el aislamiento de la bacteria y la obtención de cultivos puros.  Por ello el primer problema al estudiar una bacteria es su aislamiento del resto de los microorganismos presentes. Una vez que se ha logrado el aislamiento es posible obtener la bacteria de interés en cultivo puro.  Dicho aislamiento es la separación de un determinado microorganismo del resto de microorganismos que le acompañan. El método más usual es la siembra por estría sobre un medio de cultivo sólido adecuado dispuesto en una placa de Petri. 

Objetivo 

El objetivo de esta práctica es identificar colonias aisladas de microorganismos mediante la técnica de siembra en estría en placa, la cual se realizará en el laboratorio virtual.  

Fundamento teórico

Cubre las necesidades básicas y aplicadas de un microbiólogo en alimentos. Para lograrlo, éste ha sido elaborado en dos secciones. La primera sección cubre los aspectos teóricos de la microbiología de alimentos, en la cual se presenta a detalle, la información sobre los riesgos y seguridad en microbiología, la relación alimentos, microorganismos, la conservación de alimentos, la relación entre alimentos y enfermedades, los alimentos y enzimas producidos por los microorganismos, la higiene, control e inspección de los alimentos, los métodos microbiológicos para el análisis de alimentos, los conceptos básicos de biología molecular y los alimentos transgénicos

Descripción

Para poder realizar muchas de las pruebas necesarias para identificar microorganismos es fundamental aislar el organismo en cultivo puro. Un método común para aislar un microbio de un cultivo mixto es "sembrar" el cultivo en un medio sólido, como el agar.

El crecimiento del cultivo en un medio sólido da como resultado colonias, que se originan a partir de una única célula bacteriana, por lo que la colonia es un cultivo puro. Luego la colonia se puede volver a colocar en una placa nueva o se puede usar para inocular un medio líquido, los cuales ahora son cultivos puros. 

Después de la incubación, la placa debería tener un crecimiento en los cuatro cuadrantes donde se formaron las estrías con el asa. Cada cuadrante debe tener una menor densidad de bacterias, ya que cada uno es una disolución sucesiva del inóculo original. Finalmente el cuarto cuadrante debe tener colonias aisladas. 

Lista de materiales 

• Asa
• Placa de petri
• Mechero bunsen

Metodología 

Resultados y observaciones 

Placa 1

La morfología de esta imagen se observa como circulares: son colonias muy uniformes, completamente redondas. Irregulares: esas colonias que no tienen formas definidas y que son más bien amorfas,  su color es amarilla como mostazas, el tamaño es algo como grueso, los bordes son ondulado y rizado, su elevación se proyectan ligeramente sobre la superficie, pero lo hacen de manera regular, es decir, la elevación es uniforme en todo el diámetro de la colonia y embonadas, su aspecto es arrugadas  y suaves.

Placa 2

En esta placa se puede observar que la morfología del primer y segundo cuadrante es totalmente circular  con borde completo a diferencia del tercer cuadrante que es irregular y en el cuarto cuadrante las colonias están totalmente aisladas y ligeramente puntiformes con un color amarillento. 

Placa 3

El cultivo se realizó en 4 cuadrantes, el cuadrante A de la esquina superior izquierda, nos muestra un cultivo fusiforme, con un estriado bien definido, de ahí el cuadrante B superior derecho y C inferior derecho muestran similitudes morfológicamente, aunque el cuadrante C muestra un cultivo más puntiforme, el cuadrante D inferior izquierdo, muestra completamente la forma puntiforme. El color del cultivo total es mostaza con ligeras puntuaciones cafés en cada estría. La elevación se denota ligeramente elevado de la superficie. Los cultivos de los cuadrantes A, B Y C no se aislaron ya que entre si se vinculan, pero el cultivo D se encuentra aislado dentro del cuadrante. El borde de todos los cuadrantes son enteros.

Placa 4

La morfología que se observa es poco uniforme considerando que no se encuentran paralelas entre sí, no todas están aisladas completamente y los bordes son un tanto gruesos en algunos cuadrantes, el color es un beige opaco.

Placa 5

En el primer cuadrante se puede notar un mayor crecimiento de los microorganismos, es hasta el cuarto cuadrante donde se alcanzan a distinguir colonias aisladas. Las colonias aisladas tienen forma de círculo, sus bordes son completos y parecen estar un poco elevadas. Su superficie parece ser suave y brillante.

Conclusión 

En conclusión, son los seres más primitivos que existen en la tierra, los cuales tienen la capacidad de colonizar cualquier tipo de ambiente, estos microorganismos también participan de forma vital en todos los ecosistemas y están en interacción continua con las plantas, los animales y el hombre, también puede que los minúsculos organismos, solo se pueden observar a través de un microscopio, ayudan a resistir enfermedades, a educar el sistema inmunológico, a digerir los alimentos, a metabolizar fármacos, a determinar nuestro olor corporal.

CUESTIONARIO

 1. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de la técnica de estría cruzada virtual vs real?

Las ventajas de la técnica de estría cruzada virtual es la rapidez en la que podemos realizar la práctica, el contar con los materiales sin problema, el poder repetir la práctica sin necesidad de gastar material y las desventajas recaen principalmente en la precisión del uso de ciertos materiales que no se controlan como se haría en una técnica real y no se crea una experiencia real en la manipulación del material.

 2. ¿Qué tipo de tinciones se puede realizar para identificar la morfología del moo?

La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico, mientras que la tinción de Wright se ocupa para el diagnóstico de enfermedades muy particulares en el rubro de la parasitología.

 3. Investigue la composición química del medio AN Y PDA.

La composición química del POTATO DEXTROSE AGAR (PDA) se conforma de la siguiente manera: 

• 1000 ml  de agua destilada
• 4 patatas (almidón)
• 20 g de Dextrosa
• 15 g de Agar en polvo 

Y la composición del Agar Nutriente (AN) consta de los siguientes elementos:

• 23 g Agar nutriente 
• 5 g Destrosa 
• Agua destilada 1000 ml.

Referencias APA

Aquiahuatl Ramos, M. A., & Perez Chabela, M. L. (2004). Manual de prácticas del lanoratorio de Microbiologia General (Primera edición). Universidad Autónoma Metropolitana.  *Junta de Anda lucia. (2016). OBSERVACIÓN DE LEVADURAS. Agrega Junta de Anda Lucia. Recuperado 8 de marzo de 2022, de https://agrega.juntadeandalucia.es/repositorio/27012016/42/es-an_2016012714_9125937/cuerpo_humano/practi/microbi4.htm *